本属细菌为革兰阳性大杆菌，都能形成芽胞，芽胞直径比菌体宽度大，使菌体膨大呈梭形，故又称梭状芽胞杆菌，严格厌氧生长。本属细菌种类很多，在自然界分布广泛，常存在于土壤、动物的肠道及腐败物中。多数为腐物寄生菌，对人无害，仅少数能分泌外毒素和侵袭性酶，可使人致病，主要有破伤风梭菌、产气荚膜梭菌及肉毒梭菌等。
一、破伤风梭菌、产气荚膜梭菌与肉毒梭菌的形态及染色性
1.破伤风梭菌、产气荚膜梭菌和肉毒梭菌革兰染色标本片。
2.普通光学显微镜、镜油、擦镜纸。
分别取三种细菌革兰染色标本片，置显微镜下观察其形态与染色性。
1.破伤风梭菌为细长杆菌，芽胞为正圆形，直径比菌体宽度大，位于菌体顶端，使细菌呈“鼓槌状”，革兰染色阳性。
2.产气荚膜梭菌为革兰阳性粗大杆菌，单独存在或成双排列，菌体周围有明显荚膜（机体内标本）。
3.肉毒梭菌菌体粗大，芽胞椭圆形，直径大于菌体宽度，位于次极端，使细菌呈典型的“网球拍形”，革兰染色阳性。
二、产气荚膜梭菌的“汹涌发酵”试验
在牛乳培养基中，产气荚膜梭菌因能分解乳糖产酸，可于6～8h内使酪蛋白凝固，同时产生大量气体，冲开凝固的酪蛋白，向上推挤培养基表面的凡士林层，常将试管棉塞冲掉，气势汹涌，称为“汹涌发酵”，是鉴定本菌的特征之一。
1.菌种：产气荚膜梭菌疱肉培养物。
2.培养基：紫牛乳培养基。
1.将疱肉培养物及紫牛乳培养基管倾斜，置火焰上微微加热，使凡士林融化，并粘于管壁一侧。
2.用接种环挑取产气荚膜梭菌疱肉培养物两环，接种于紫牛乳培养基中。
3.待接种后再稍加温，直立试管，用凡士林封盖。置37℃温箱中培养6～8h，观察生长情况，注意有无“汹涌发酵”现象。
产气荚膜梭菌可分解乳糖产酸（紫牛乳培养基中溴甲酚紫指示剂由紫色变为黄色），将酪蛋白凝固，同时产生大量气体，冲散凝固的酪蛋白，将凡士林冲向试管口，出现“汹涌发酵”现象。
三、产气荚膜梭菌动物试验
1.产气荚膜梭菌疱肉培养物。
2.正常小白鼠，注射器、温箱、载玻片、接种环、酒精灯等。
用注射器取产气荚膜梭菌培养物0.2～1.0ml，注入小白鼠腹腔内。5～10min后，将小白鼠处死，放于37℃温箱中5～8h。取出动物，观察有无膨胀气肿现象。解剖动物，观察脏器及肌肉有无气泡，然后取内脏或心血涂片检查。
可见小白鼠腹部鼓胀，尸检可见各脏器与肌肉内有大量气泡，尤以肝脏为最明显，常称之为“泡沫肝”，并有特殊的臭味。内脏或心血涂片，经革兰染色镜检，可见有革兰阳性、具有明显荚膜的短粗大杆菌，为产气荚膜梭菌。
四、厌氧培养法
（一）疱肉培养基厌氧培养法
培养基中的肉渣含有不饱和脂肪酸和谷胱甘肽，具有还原性，能吸收培养基中的氧，使氧化还原电势下降。又因以凡士林封闭培养基液面，故可防止空气中的游离氧进入培养基内，形成良好的厌氧条件，适于培养厌氧菌。
1.破伤风梭菌疱肉培养物。
2.疱肉培养基。
3.接种环、酒精灯、温箱。
1.用接种环挑取破伤风梭菌疱肉培养物两环，接种于疱肉培养基中（接种方法同前）。
2.置37℃温箱中培养24～28h，观察细菌生长情况，注意培养基的混浊度，肉渣有无变化，有无气体产生。
破伤风梭菌使肉汤轻度混浊，肉渣部分被消化，微变黑，产生气体。
（二）碱性焦性没食子酸厌氧培养法
焦性没食子酸是还原剂，在碱性溶液中能迅速吸收氧气，生成深棕色的焦性没食子橙，使培养皿内造成厌氧环境。
1.破伤风梭菌疱肉培养物；
2.血琼脂平板培养基；
3.无菌纱布块、脱脂棉、焦性没食子酸、10％NaOH溶液、石蜡等；
4.平皿、接种环、温箱、酒精灯等。
1.将细菌划线接种于琼脂平板上。
2.取方形玻璃一块，中央置脱脂棉一片，放1g焦性没食子酸于脱脂棉上，然后覆盖一小块无菌纱布，再向纱布上滴加10％NaOH溶液约1ml。
3.立即将种有细菌之平板反盖于方形玻璃上，并在平板周围速用融化石蜡密封。
4.置37℃温箱中培养24～28h，取出，观察菌落特点及有无溶血现象等。
破伤风梭菌在血琼脂平板上形成中心紧密、周边疏松、边缘不整齐、呈羊齿状的菌落，菌落周围有溶血环。
1.厌氧菌有什么培养特性？
